臺盼藍(Trypan blue)又稱錐藍或錐蟲藍等,分子式為C34H24N6Na4O14S4,分子量為960.81,CAS Number 72-57-1,是一種陰離子型染料。Trypan blue 不能透過活細胞正常完整的細胞膜,故活細胞不著色,即產生所謂的拒染現象 ,而死亡細胞的細胞膜通透性增加,可使染料通過細胞膜進入細胞內,使死細胞著色呈藍色,是常用的檢測細胞活率的方法。通常認為細胞膜完整性喪失,即可認為細胞已經死亡,這與中性紅作用相反。因此,借助臺盼藍染色可以非常簡便、快速地區分活細胞和死細胞。臺盼藍是組織和細胞培養中常用的死細胞鑒定染色方法之一。
尚寶生物 Trypan blue stain(1%)常用于檢測細胞膜的完整性以及細胞是否存活?;罴毎粫蝗境伤{色,而死細胞會被染成淡藍色。臺盼藍可被巨噬細胞吞噬,故可用于巨噬細胞的活體染色劑。臺盼藍染色后,通過顯微鏡下直接計數或顯微鏡下拍照后計數,就可以對細胞存活率進行比較精確的定量,0.4%為常用的濃度。
產品組成:
試劑名稱 | 規格 | 保存條件 |
臺盼藍染色液(1%) | 10ml/50ml | 4℃ |
自備材料:
1. PBS
2. 細胞計數板
3. 顯微鏡
操作步驟(僅供參考):
1. 收集細胞:
如果收集貼壁細胞,應用胰蛋白酶-EDTA溶液消化細胞,收集細胞。如果收集懸浮細胞,則可以直接收集細胞。收集好的細胞在1000~2000g離心1min,棄上清,用1ml PBS重新懸浮細胞沉淀。
2. 臺盼藍染色:
吸取100μl細胞懸液到1.5ml或0.5ml離心管內,加入100μl Trypan blue stain(1%) 輕輕混勻,靜置染色 3min(染色時間可適當延長,但不宜超過10min)。
3. 細胞計數:
吸取經過染色后的細胞,用血細胞計數板計數。通常如果要比較精確地進行定量,每個細胞樣品至少需要數 500個細胞,數出藍色細胞和細胞總數。細胞存活率計算公式如下:
細胞存活率=(細胞總數-藍色細胞數)/細胞總數×100%。
注意事項:
1. Trypan blue stain 對人體有輕微毒性,請注意小心防護。
2. 注意凋亡小體偶爾也有臺盼藍拒染現象。
3. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:12個月有效。